А.Д. Мыца, Л.Ю. Кокаева, С.Н. Еланский
Аоміцэт Фітафтора інфэстансы (Mont) de Bary выклікае фітафтароз - небяспечнае захворванне бульбы і тамата. Адным з асноўных крыніц першаснага инокулюма P. infestans з'яўляюцца таўстасценныя палавыя спачываюць структуры - ооспоры.
Гібрыдныя ооспоры, якія ўтвараюцца ў выніку скрыжавання генетычна розных бацькоўскіх штамаў, спрыяюць павышэнню генатыпічнай разнастайнасці ў папуляцыі, з прычыны чаго паскараецца працэс адаптацыі штамаў да новых гатункаў і ўжывальным фунгіцыдамі.
адукацыя ооспор P. infestans у палявых умовах адзначана ў многіх краінах свету: Расіі (Smirnov et al., 1999), Нарвегіі (Hermansen et al., 2002), Швецыі (Strömberg et al., 2001), Нідэрляндах (Kessel et al., 2002) і іншых рэгіёнах. Ооспоры здольныя больш за 2 гадоў захоўвацца ў глебе ў жыццяздольным стане (Bødker et al., 2006) і выклікаць заражэнне раслін пасля перазімоўкі (Уланава і інш., 2010; Lehtinen et al., 2002).
Раней было паказана, што лісце раслін розных ярусаў куста бульбы маюць адрозненні ў ўстойлівасці да фітафтарозу; яна павялічваецца ад ніжніх лісця да верхніх. Гэтая тэндэнцыя не залежыць ад узросту ліста, ўзросту расліны, гатункі бульбы (Vesper et al., 2003 г.). У той жа час дадзеных пра адрозненні інтэнсіўнасці ооспорообразования ў лісці розных ярусаў куста бульбы ў літаратуры нам знайсці не ўдалося. Аднак калі такія адрозненні існуюць, то іх варта ўлічваць пры адборы ліставых пробаў для правядзення аналізу адукацыі ооспор і пры интерперетации вынікаў, атрыманых іншымі аўтарамі. Мэтай сапраўднай працы было вывучэнне адукацыі ооспор ў отчлененных лісці розных ярусаў расліны бульбы, змешчаных у аднолькавыя ўмовы вільготных камер.
Матэрыялы і метады
У працы выкарыстоўвалі 5 изолятов P. infestans розных тыпаў спарвання, выдзеленых з здзіўленых узораў, прывезеных з Маскоўскай, Разанскай і Ленінградскай абласцей. З іх былі падабраныя 3 пары штамаў розных тыпаў спарвання, якія даюць багатыя ооспоры пры цесцю ў агаризованной аўсянай асяроддзі.
Для тэставання выкарыстоўвалі выгадаваныя ў цяпліцы (у тарфяным субстраце) безвирусные расліны бульбы наступных гатункаў: раннія Сандрын, зорачка, уладарыў, Азiрыса, среднеранний Ільінскі, сярэдняспелы Янка.
Для аналізу адбіралі простыя лісце з розных узроўняў расліны бульбы. Тры ліста былі адабраны з ніжняга ўзроўню (4 ніжніх складаных ліста), тры - з верхняга (3-4 складаны ліст зверху), і тры ліста з цэнтра куста. Простыя лісце ўзважвалі, фатаграфавалі на каардынатнай паперы (для разліку аб'ёму і плошчы), пасля чаго змяшчалі ніжнім бокам уверх на паверхню стэрыльнай вады, разлітай па 25 мл у кубкі Петры. Далей кожны ліст заражалі адной кропляй змяшанай завісі зооспорангиев изолятов А1 і А2 тыпу спарвання. Для трох лісця, адабраных з кожнага ўзроўню, выкарыстоўвалі инокулюм трох розных пар изолятов. Адзін ліст заражалі сумессю инокулюма адной пары изолятов.
Для падрыхтоўкі завісі зооспорангиев изоляты розных тыпаў спарвання нарошчвалі на агаризованной аўсянай асяроддзі на працягу 7 сутак, пасля чаго з іх змывалі зооспорангии стэрыльнай дыстыляванай вадой. Канцэнтрацыя инокулюма складала 5/7 зооспоры ў поле зроку мікраскопа пры павелічэнні 80х. Кожны ліст заражалі адной кропляй змяшанай завісі зооспорангиев изолятов А1 і А2 тыпу спарвання.
Ва ўсіх эксперыментах выкарыстоўвалі па 3 бульбяных ліста на варыянт. Пасля інкубацыі на працягу 20 сутак пры 18 ° С кожны ліст гомагенізаваных ў ступцы з 2 мл дыстыляванай вады. З атрыманай завісі адбіралі па 3 пробы, з якіх рыхтавалі прэпараты для мікраскапіі.
У кожным варыянце праглядалі 180 палёў гледжання, пасля чаго пералічвалі лік ооспор на 1 мм2 паверхні ліста. Вынікі улікаў для кожнага варыянту усредняет.
Для разліку давернага інтэрвалу (μ) для ўзроўню значнасці 0,05 выкарыстоўвалі наступную формулу
дзе s - стандартнае адхіленне, n - лік вымярэнняў, t - канстанта t-тэсту для ўзроўню значнасці 0,05. Усе разлікі праводзілі ў праграме Excel (пакет Microsoft Office).
Вынікі і абмеркаванне
Інакуляцыя лісця, сабраных з розных ярусаў куста бульбы і змешчаных у аднолькавыя ўмовы вільготных камер, выявіла адрозненні ў інтэнсіўнасці адукацыі ооспор. На ўсіх даследаваных гатунках максімальны лік ооспор утварылася пры інакуляцыя лісця, сабраных з ніжняга і сярэдняга ярусаў куста. Дакладных адрозненняў у адукацыі ооспор ў ніжніх і сярэдніх лісці не было выяўлена.
Мінімальны лік ооспор утварылася ў лісці верхняга яруса (мал. 1).
У лісці ніжняга і сярэдняга ярусаў максімальную колькасць ооспор ўтварылася ў гатунках Сандрын, Ільінскі, зорачка, уладарыў і Озирис. Некалькі менш інтэнсіўна яны ўтвараліся ў лісці гатункі Янка. Максімальны лік ооспор ў лісці верхняга яруса назіралі ў лісці гатункі уладарыў, далей у парадку змяншэння ішлі зорачка, Азiрыса, Янка, Ільінскі, Сандрын, аднак не ўсе адрозненні былі статыстычна пэўныя.
Мал. 1. Адукацыя ооспор ў лісці розных ярусаў куста бульбы. Ніжнія - лісце трох ніжніх узроўняў куста, верхнія - 3-4 складаны ліст ад верхавіны расліны, сярэднія - з сярэдзіны куста.
Планкі хібнасцяў паказваюць даверны інтэрвал для ўзроўню значнасці 0,05.
У поле адукацыі ооспор ў ніжніх і сярэдніх лісці куста спрыяюць і мікракліматычныя ўмовы: больш высокая вільготнасць, зніжаная сонечная інсаляцыя і сутачныя ваганні тэмператур (Harrison, 1992). Пры верхнім апырскванні у ніжнюю і цэнтральную часткі куста трапляе менш пестыцыдаў. Для памяншэння адукацыі ооспор варта выкарыстоўваць тэхналогіі, якія дазваляюць паспяхова дастаўляць фунгіцыды у ніжнюю і сярэднюю часткі куста. Добрыя вынікі можа прынесці выкарыстанне апырсквальнікаў з турбулентным патокам паветра і сістэмных фунгіцыдаў, здольных распаўсюджвацца на неапрацаваныя часткі куста.
Праца выканана пры падтрымцы Расійскага Навуковага фонду (праект № 14-50-00029).
Артыкул апублікаваная ў часопісе «Абарона бульбы» (№2, 2015)